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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化細胞角蛋白8抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-CK8(Ser23) |
貨號 |
BH-K016117 |
英文名稱 Anti-phospho-CK8(Ser23)
中文名稱 磷酸化細胞角蛋白8抗體
別 名 Cytokeratin 8 (phospho S23); p-Cytokeratin 8 (phospho S23); card2; Cardiac autoantigen 2 120kD; CK 8; CK-8; ck8; Cyk 8; cyk8; CYKER; Cytokeratin 8; Cytokeratin endo A; Cytokeratin-8; Cytokeratin8; DreK8; EndoA; k0; CYK8; k2c8; K2C8_HUMAN; k8; Keratin 8; Keratin type ii cytoskeletal 8; Keratin, type II cytoskeletal 8; Keratin-8; Keratin8; KO; Krt 2.8; Krt 8; krt8; KRT-8; MGC118110; MGC174782; MGC53564; MGC85764; sb:cb186; Type-II keratin Kb8.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 細胞生物 **學 信號轉導 細胞類型標志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human CK8 around the phosphorylation site of Ser23
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CD40配體(CD40L)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforClusterOfDifferentiation40Ligand(CD40L) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
含卷曲螺旋域蛋白80(CCDC80)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforCoiledCoilDomainContainingProtein80(CCDC80) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
核酸外切酶1(EXO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforExonuclease1(EXO1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
頂體后致密板WW域結合蛋白(PAWP)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforPostacrosomalSheathWWDomainBindingProtein(PAWP) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Toll樣受體7(TLR7)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTollLikeReceptor7(TLR7) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforProcollagenIN-TerminalPropeptide(PINP) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
脊椎蛋白1(SPON1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforSpondin1(SPON1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
白介素1θ(IL1θ)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforInterleukin1Theta(IL1F10) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
景天庚酮糖激酶(SHPK)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforSedoheptulokinase(SHPK) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
脫落酸(ABA)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAbscisicAcid(ABA) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
G蛋白γ5/Gγ5 抗體
G蛋白偶聯(lián)受體12抗體
G蛋白偶聯(lián)受體MRGX2蛋白抗體
甘氨酸裂解系統(tǒng)H蛋白抗體
葡糖淀粉酶抗體
G蛋白結合蛋白6體
谷氨酸脫氫酶2抗體
高爾基體膜蛋白GP73抗體
G蛋白偶聯(lián)受體15抗體
生長抑制DNA損傷基因GADD45β抗體
**中心相關核蛋白MCM3抗體
磷酸化細胞角蛋白8抗體性品紅2,6Dichloropyridine,98%25G通用試劑
茜素絡合指示劑(IND)4Vinylpyridine,95%25ML通用試劑
茜素絡合指示劑(高純級,98%)4Picoline,99%100ML通用試劑
偶氮胂 I4,4'Bipyridine,98%1G通用試劑
堿性品紅(生物染色級)2,2'Bipyridyl, ≥99%5G通用試劑
堿性品紅(分析標準品)2,4,6Trimethylpyridine,≥99.0%25ML通用試劑
百里香藍Nicotinonitrile,98%100G通用試劑
鉍試劑Ⅱ(CP)2Chloro3(trifluoromethyl)pyridine,97%1G通用試劑
鉍試劑Ⅱ(98%)Hexadecylpyridinium bromide,98%25G通用試劑
試劑ⅡHexadecylpyridinium chloride monohydra...25G通用試劑
鄰三紅2Methylpyridine,98%25ML通用試劑
鹽副品紅2Hydroxypyridine,97%25G通用試劑
燦爛黃2Chloropyridine,99%100G通用試劑
剛果紅(AR)2Amino3chloro5(trifluoromethyl)py...5G通用試劑
鈣羧指示劑(AR)Piperidine,≥99.5%100ML通用試劑