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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
昆蟲質(zhì)膜蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
昆蟲 |
2-8℃ |
BH-D85296 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
載脂蛋白H 48T/96T
載脂蛋白C4 48T/96T
小鼠神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠流行性出血熱抗體(EHF-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
角化粒 48T/96T
大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素-18結(jié)合蛋白 48T/96T
嗜中性及細胞活化肽-2 48T/96T
人乙肝E抗原(HBeAg)ELISA試劑盒48T/96T試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
昆蟲質(zhì)膜蛋白提取試劑盒小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格: 48T GIP(Mouse Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide)ELISA Kit
小鼠白三烯B4 規(guī)格: 48T LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit
兔鉤端螺旋體IgG 規(guī)格: 96T Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit
羅氏沼蝦諾達病毒 規(guī)格: 48T Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit
熒光素標記磷酸化熱休克蛋白90α抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)/FITC
熒光素標記ABCB6抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ABCB6/FITC
熒光素標記醛縮酶A抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Aldolase A/FITC
熒光素標記Dystrobrevin α蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DRP3/FITC
熒光素標記凋亡抑制因子5抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-API5/AAC11 /FITC
熒光素標記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-AT1R/FITC
熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC
羽毛刀片 50片-盒 瓶
0.6ml離心管,10盒/箱 1000支 盒
2ml離心管,10盒/箱 500支 盒
0.5ml離心管盒 72孔 個
2ml離心管 500支 包
0.5ml離心管 1000支 包
Glutaraldehybe Soution 戊二醛25%水溶液 10ml 瓶
Spironolactone 螺內(nèi)酯 1g 瓶
CM Sepharose FF CM-瓊脂糖凝膠 FF 100ml 瓶
Ficoll 400 聚蔗糖400 10g 瓶