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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
NP-40裂解液 |
50ml/100ml |
WB、IP等 |
細(xì)胞、組織 |
2-8℃ |
BH-D85378 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
趨化因子ENA-78 48T/96T
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠心肌肌鈣蛋白Is(cTnI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
生長分化因子6 48T/96T
小鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞雌(E)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
NP-40裂解液人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格: 48T Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 規(guī)格: 48T Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit
人高爾基蛋白73 規(guī)格: 48T Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit
人生長相關(guān)蛋白43 規(guī)格: 48T Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit
人肝再生增強因子 規(guī)格: 96T Human ALR ELISA Kit
大鼠甘油三酯 規(guī)格: 48T TG ELISA Kit
大鼠磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格: 48T pERK ELISA Kit
大鼠白介素1受體拮抗劑 規(guī)格: 48T IL1Ra ELISA Kit
大鼠胱天蛋白酶3 規(guī)格: 48T Casp-3 ELISA Kit
大鼠克拉拉蛋白 規(guī)格: 48T CC16 ELISA Kit
大鼠補體片斷3a 規(guī)格: 48T C3a ELISA Kit
Carmine 洋紅 1g 瓶
5-Methylcytosine 5-甲胞嘧啶 1g 瓶
PectolyaseY-23 果膠酶Y-23 100mg 瓶
TaqMan One Step RT-qPCR Kit 50T 支
anti-His TagMouse Monoclonal antibody 100ul 瓶
牛IgG干粉 100mg 支
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA 1g 瓶
Ficoll Plus 1.077 200ml 瓶
Yunaconitine 滇堿 70578-24-4 20mg
Peimine 貝母素甲 23496-41-5 20mg