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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
Pepstatin |
5mg |
|
蛋白 |
-20℃保存 |
BH-D85400 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
8羥基鳥嘌呤 48T/96T
人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白三烯B4(LTB4) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3 48T/96T
小鼠補體因子H(CFH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
貓α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
抗Livin 抗體 48T/96T ALA Antilivin antibody
人顆粒溶素(granulysin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Pepstatin 規(guī)格: 0.5mg ART(Artemin)(抗原)
環(huán)腺苷酸應答元件結(jié)合蛋白(抗原) 規(guī)格: 0.5mg CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1)
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原) 規(guī)格: 0.5mg GLUT2(Glucose transporter type 2)
胰島素受體底物-2(抗原) 規(guī)格: 0.5mg IRS-2
極光激酶B抗原 規(guī)格: 0.5mg Aurora B
蛋白磷酸酯酶-1(抗原) 規(guī)格: 0.5mg PP-1
ZCWCC1抗原 規(guī)格: 0.5mg ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1)
膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽) 規(guī)格: 0.5mg TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2)
周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗原 規(guī)格: 0.5mg Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C)
降鈣素受體樣蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor)
鳥苷三磷酸酶-發(fā)動蛋白2抗體 規(guī)格: 0.5mg Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 )
Deoxycholic acidsodium salt 脫氧膽酸鈉 25g 瓶
過碘酸-雪夫(AB-PAS)染色試劑盒 6×50ml 盒
Cy5.5-N-羥基琥珀酰亞胺酯 1 mg 支
Proteinase K 蛋白酶 K 100mg 瓶
UTP.Na3 尿苷-5'-三磷酸三鈉 250mg 瓶
dNTPs Mix(10mM each) 1ml 支
anti-GST Tag Mouse Monoclonal antibody 100ul 瓶
兔IgG干粉 1g 支
30%丙烯酰胺(29:1) 500ml 瓶
小鼠外周血分離液試劑盒 200ml/KIT 盒