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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
酵母核糖體提取試劑盒 |
50T/100T |
提取 |
酵母 |
2-8℃ |
BH-D85466 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
雞促生長釋放(GHRH)ELISA 試劑盒48T/96T試劑盒 組裝/原裝
兔子白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
8羥基脫氧鳥苷 48T/96T
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈣腔蛋白 48T/96T
白介素-20 受體a 48T/96T
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人黏著斑激酶(FAK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酵母核糖體提取試劑盒熒光素標(biāo)記MD-1蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-LY-86/MD-1/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化髓樣白血病-1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC
熒光素標(biāo)記巨噬炎性蛋白3β 抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MIP-3 Beta/ELC/CCL19/FITC
熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MMP-20/FITC
熒光素標(biāo)記肌肉特異性泛素蛋白連接酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MuRF1/Trim63/FITC
熒光素標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Nestin/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化谷氨酸受體1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC
熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽B受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NKR/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化D型受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363) /FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-P53 (Thr81)/FITC
熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml ANti-PDCD4/FITC
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