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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
細(xì)胞懸液制備試劑盒 |
100ml |
|
|
|
BH-D85472 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠尾加壓素II(Urotensin II) ELISA試劑盒 96T/48T ELISA試劑盒 組裝/原裝
羊促黃體(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人卵泡刺(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β-聯(lián)蛋白 48T/96T
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞懸液制備試劑盒層粘連蛋白β1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Laminin Beta 1
磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-MARCKS (Ser162)
單核趨化蛋白1抗體(人) 規(guī)格: 0.2ml Anti-MCP-1/CCL2
中腦核仁蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Midnolin isoform Protein 1
多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-MRP4/ABCC4
核小體組裝蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-NAP1/NAP1L1
一氧化氮抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Nitric oxide/NO
高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-NF-H
NADH復(fù)合體1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-MT-ND1
P2Y4受體抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-P2Y4R/P2Ry4
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229)
細(xì)學(xué)葡萄糖 (LP0071) 特價(jià)供應(yīng) Oxoid
Peptone Special 特殊蛋白胨 現(xiàn)貨促銷 Oxoid 500g
示蛋白胨(Proteose Peptone) 特價(jià)供應(yīng) Oxoid 500g
谷氨酸鈉 (LP0124) 現(xiàn)貨促銷 Oxoid
一號(hào)植物蛋白胨 Vegetable Peptone 特價(jià)供應(yīng) Oxoid 500g
植物蛋白胨磷酸鹽肉湯 (VG0200) 特價(jià)供應(yīng) Oxoid
植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone Broth 現(xiàn)貨促銷 Oxoid 500g
****大豆蛋白胨(GMO-Free Soya Peptone) 現(xiàn)貨促銷 Oxoid 500g
Nutrient Agar 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 特價(jià)供應(yīng) Oxoid 500g