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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
色素去除柱 |
30 根 |
|
|
2-8℃ |
BH-D85499 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
基質(zhì)金屬蛋白酶-13 48T/96T
腫瘤相關(guān)抗原 48T/96T
人麻疹病毒IgM抗體(MV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管**素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 48T/96T
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 (DNMT1) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
色素去除柱神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-P311 protein
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424)
PDZ連接激酶/T-LAK源蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-PBK/TOPK
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-PEPT2/SLC15A2
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-PKC delta (Tyr52)
蛋白激酶B2 規(guī)格: 0.1ml Anti-AKT2
再生基因蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-REG4/RELP
E選擇素抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-E-Selectin/CD62E
6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體 規(guī)格: 1ml Anti-S6PDH
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-SHC (Tyr349)
Smad 7抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Smad7
氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)
RS瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
AHM鑒別用培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
蔗糖胰蛋白胨肉湯 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE) 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
李氏選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
糖發(fā)酵肉湯基礎(chǔ) 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)