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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
透析袋,截留分子量7KD;直徑28mm;壓平寬度44mm |
1卷,5M |
|
|
2-8℃ |
BH-D85504 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛干擾素γ(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
丙酮酸激酶M2型同工酶 48T/96T
大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1) ELISA 劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肌酸激酶MB同工酶 48T/96T
白細(xì)胞介素1 Racp 48T/96T
透析袋,截留分子量7KD;直徑28mm;壓平寬度44mm羅丹明標(biāo)記胰島素受體-α 抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ISR- Alpha protein/RBITC
熒光素標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-KT3 tag/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-RSK3 (Thr353/356) /FITC
熒光素標(biāo)記脂蛋白脂酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-LPL/FITC
熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MAPKK1 /FITC
熒光素標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Melamine/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC
生物素標(biāo)記 肌球蛋白輕鏈3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MYL3/Myosin light chain 3/Biotin
熒光素標(biāo)記核受體輔助激活蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NCOA2/KAT13C /FITC
熒光素標(biāo)記中性粒明膠酶相關(guān)載脂蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NGAL/FITC(Neutrophil Gelatinase associated Lipocalin)
熒光素標(biāo)記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-eNOS (Ser113)/FITC
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