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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
轉(zhuǎn)膜液(Western),PVDF(1X) |
100ml/500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85558 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
血管內(nèi)皮生長因子A 48T/96T
大鼠催乳素(PRL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胃動蛋白2 48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶-9 48T/96T
兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗風疹病毒IgM抗體(anti-RV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
干擾素-α 48T/96T
轉(zhuǎn)膜液(Western),PVDF(1X)熒光素標記嗜酸粒趨化蛋白24抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CCL24/Eotaxin-2/FITC
熒光素標記CD23抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD23/Fc EpsilonR II /FITC
熒光素標記反應性溶血膜抑制蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD59/FITC
熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD161/NK1.1/FITC
熒光素標記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-C/EBP Beta/FITC
熒光素標記角蛋白15抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CK15/FITC
熒光素標記C-反應蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CRP/FITC
熒光素標記抗環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CNGA2/FITC
熒光素標記表面趨化因子受體7抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CXCR7/RDC1/FITC
熒光素標記凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DAPK1/FITC
熒光素標記穿膜蛋白DLK1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DLK1/FITC
解脲支原體瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于解脲支原體培養(yǎng),使用前須向 培養(yǎng)基中添加尿素、小牛血清及抑 劑現(xiàn)貨促銷
龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ)CVB 250g/瓶 用于鼠疫桿的選擇性培養(yǎng),需添 加脫纖維羊血 50701特價供應
溶血瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于鼠疫桿的培養(yǎng),需添加脫纖 維兔血 50701現(xiàn)貨促銷
赫氏培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鼠疫桿的分離基礎(chǔ)特價供應
赫氏增液 250g/瓶 用于鼠疫桿的培養(yǎng)現(xiàn)貨促銷
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溶酶多粘素瓊脂基礎(chǔ)LPA 250g/瓶 用于炭疽桿分離培養(yǎng),每 100ml培養(yǎng)基中添加 1 支 22101、1 支22102 和 2 支 21209特價供應
碳酸氫鈉瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于炭疽桿的莢膜培養(yǎng),每 88ml 培養(yǎng)基中添加 12ml 無 10%碳酸 氫鈉溶液特價供應
指示選擇性培養(yǎng)基 250g/瓶 用于炭疽桿的分離鑒別,需加入 多粘素 B、溶酶、乙酸亞胺現(xiàn)貨促銷