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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
HRP酶穩(wěn)定劑 |
50ml/ 100ml/ 200ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85572 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
制瘤素M受體 48T/96T
脂聯(lián)素受體2 48T/96T
陽離子轉(zhuǎn)運蛋白2 48T/96T
大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人雄烯二酮(ASD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CXCR3 48T/96T
半乳糖結合蛋白9 48T/96T
小鼠補體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
HRP酶穩(wěn)定劑 小鼠嗜酸性粒陽離子蛋白 規(guī)格: 48T Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格: 48T GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 規(guī)格: 48T AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit
小鼠可溶性CD30配體 規(guī)格: 48T sCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit
小鼠分泌型球蛋白A 規(guī)格: 48T sIgA(Mouse secretory immunoglobulin A) ELISA Kit
小鼠周期素D1 規(guī)格: 48T Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit
小鼠高敏甲狀腺素 規(guī)格: 48T u-T4(Mouse Ultrasensitivity Thyroxine) ELISA Kit
小鼠組蛋白H2b 規(guī)格: 48T histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96 規(guī)格: 48T HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格: 48T Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit
兔子腫瘤壞死因子α 規(guī)格: 96T TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit
Middle Brook 7H11 瓊脂基礎 250g/瓶 用于分枝桿的分離培養(yǎng),每 90ml 培養(yǎng)基中添加 0.5ml 甘油(21702) 和 10ml22114現(xiàn)貨促銷
Middlebrook 7H9 肉湯基礎 250g/瓶 用于分支桿的培養(yǎng),每 90ml 需添加 0.2ml 甘油、0.05g 吐溫 80 和10ml22113特價供應
Middlebrook ADC 增液 20ml×20 支/箱 每支用于 180ml12163 中現(xiàn)貨促銷
Middlebrook OADC 增液 20ml×20 支/箱 每支用于 180ml12163 中特價供應
Lowenstein-Jensen 培養(yǎng)基 250g/瓶 含天冬酰胺,用于分枝桿的分離 和鑒定,需添加甘油及雞蛋現(xiàn)貨促銷
雙抗巧克力瓊脂基礎BC 250g/瓶 用于嗜血桿和奈瑟的培養(yǎng),每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 22109現(xiàn)貨促銷
酸性 L-J 培養(yǎng)基 250g/瓶 含天冬酰胺,用于堿性物質(zhì)處理的 分枝桿標本,需添加甘油及雞蛋特價供應
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淋病奈瑟瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于淋病奈瑟的分離與培養(yǎng),需 添加 7%脫纖維羊血 50701現(xiàn)貨促銷