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酸性磷酸酶(ACP)檢測試劑盒
50T
BH-02X9725
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:
儀器準備: 1.激光共聚焦顯微鏡或熒光分光光度計或酶標儀或流式細胞儀,
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準備:
PBS 緩沖液或者 HBSS
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
4.黑色 96 孔板
產品特點:
1.使用方便:可用激光共聚焦顯微鏡直接觀察、熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀
檢測;
2.背景低,靈敏度高;
3.線性范圍寬,使用方便。
使用方法:
樣本處理:
1、剛取得的新鮮組織樣本用PBS洗凈。
2、準確稱取50mg組織,加入1mL勻漿緩沖液A,用玻璃勻漿器充分勻漿。
3、在100×g,4℃離心3分鐘,棄沉淀,取上清。
樣本檢測:
1、在96孔板中加入200μL勻漿上清液、2μL DHE探針,用移液器吹打,使之充分混勻。
2、在37℃避光孵育30分鐘。
3、置于熒光酶標儀中,后于激發(fā)波長為488~535nm、發(fā)射波長610nm檢測熒光強度。
蛋白定量:
1、另取50μL上清勻漿液,用PBS大約稀釋30倍。
2、取100μL進行蛋白定量。
結果處理:
以熒光強度/毫克蛋白表示組織活性氧強度。
注意事項:1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
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