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技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:脊髓灰質炎病毒2型熒光PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P64481
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
Ai-PAI-2/FITC 熒光su標記纖溶mei原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
mouse IgG/Biotin 生物su化小鼠IgGMulti-class aibodies: 1ml
周期suH抗體 Ai-Cyclin H 0.2ml
Rabbit ai-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
FAR1 英文名稱: 脂肪?;鵄還原mei1抗體 0.2ml
Rhesus aibody Rh Phospho-VASP(Ser157) 磷suan化血管擴張刺激磷蛋白抗體 0.1ml
mouse IgG/Biotin 生物su化小鼠IgGMulti-class aibodies: 1ml
P16/CDKN2A (Cyclin-depende kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16(抗原)Multi-class aibodies: 0.5mg
Ai-CD48/SLAMF2 CD48抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh P4HB 蛋白二硫鍵異構meiP4HB抗體 0.2ml
AFP Kit Human 人 AFP / alpha-fetoprotein ELISA配對抗體 ELISA
TXNRD1 英文名稱: 硫氧環(huán)蛋白還原mei1抗體 0.2ml
CD168 英文名稱: 透明質suan介導細胞游走受體抗體 0.2ml
Ai-CD48/SLAMF2 CD48抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
SSEA4 英文名稱: 階段特異性胚胎表面抗原4抗體 0.1ml
Ep300 英文名稱: CREB結合蛋白p300抗體 0.1ml
早老su蛋白-1抗體 Ai-PS-1 0.2ml
Ai-Synapsin I /FITC 熒光su標記神經(jīng)突觸su1抗體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 磷suan化原活化蛋白激mei磷suanmei-1抗體 0.1ml
HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a(抗原)Multi-class aibodies: 0.5mg
脊髓灰質炎病毒2型熒光PCR檢測試劑盒氯吡脲;氯吡苯脲;吡效隆克林霉su磷suan酯DEPC水
醋suan鎂水(分子生物學級)土霉suDMDC水
磷suan二氫鈉一水(ACS級)鹽suan環(huán)suDEPC處理試劑盒
葡萄糖suan鈣鹽suan金霉suDMDC處理試劑盒
乙二乙suan鈉鹽二水青霉suVRNA樣品儲存液
十二烷基-β-D-麥芽糖;月桂酰基麥芽糖純化RNA樣品儲存液
鹽suan氨基脲呋辛酯mRNA純化樹脂再生試劑盒
硫suan鏈霉su溶液,30 mg/ml呋辛RNA比色法定量檢測試劑盒